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    蛋白酶K
    时间:2020-01-02 09:54:40 来源:
蛋白酶K
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蛋白酶K

英文名:Pro teinase K

别名:Endopeptidase K; Prok; Protease K; Tritirachium album proteinase K

产品名称:蛋白酶K

青蛙appapp无限观看CAS 登录号:39450-01-6

EINECS 登录号:254-457-8

活性:>30U/mg

白色或类白色粉末,是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,来源于白色念球菌(. Tritirachium album. ),具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活,反而增强和稳定酶活性,并在较广的PH范围内(PH4-12.5)均有活性。在组织或细胞核酸分离时,使核酸酶(RNA和DNA)以及反应中其他酶失活

蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,从布氏白僵菌(Beauveria bassiana)中纯化得到,用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性,在尿素和SDS中也较为稳定,还具有降解天然蛋白质的能力。

青蛙appapp无限观看规格:100毫克普通装或客户定制

比活性值:38 U蛋白

来源种属:酵母菌

分子质量:28,650

(二)、产品检测报告

1、稀释缓冲液

根据需要,利用20mM Tris-HCL 缓冲液(PH 7.5)溶解成20mg/ml的工作浓度。

2、质量说明

活性单位定义

青蛙appapp无限观看37℃、PH7.5条件下,每分钟可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量,定义为一个单位。

脱氧核糖核酸酶残留

以λDNA为底物,37℃消化4小时以上,未检测到脱氧核糖核酸酶活性。

核糖核酸酶残留

37℃消化12小时以上,未检测到核糖核酸酶活性。

青蛙appapp无限观看3、酶纯度测定(SDS-PAGE)

结果:蛋白酶K纯度超过99.2%。

4、酶活性测定

蛋白酶K比活性值

比活性值(U)38

5、酶稳定性测定(-20℃冷冻条件下,12个月的数据)

结果:干粉状态正确储存,一年内酶活性保持不变;溶解状态酶活性一年内降低小于2%。


1、’动物基因组提取(蛋白酶K浓度为20mg/ml)

不影响动物基因组的有效提取√

与不加蛋白酶K的样品相比,能有效降解蛋白质√

2、降解蛋白质能力

青蛙appapp无限观看与15ug BSA 37℃孵育1小时,BSA可有效降解√

青蛙appapp无限观看(四)、应用范围

  蛋白酶K的用途广泛,主要的应用行业包括:医疗及基础研究领域:基因诊断试剂盒;基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶;此外,还应用于:皮革工业(皮革软化及精细化、脱毛和软化、蚕丝脱胶)制备脉冲电泳的染色体DNA;提取组织中非蛋白成分时,降解含有蛋白质杂质;食品、酿造工业:肉类嫩化、酒类澄清;洗涤工业:酶洗衣粉、洗衣液等也有应用。

(五)、贮存和使用

青蛙appapp无限观看  干粉条件下有效期为24个月,液态时-20℃保存12个月。客户利用缓冲液溶解后,需要-20℃贮存。溶解后,分装成若干份,方便使用,避免反复冻溶。如果需要在2-8℃环境下放置,超过三天,建议过滤除菌或加入抑菌剂如3%叠danhuana,防止微生物污染。

  孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。

三、产品优势

青蛙appapp无限观看  蛋白酶K,是一种来源于新发现的真菌蛋白酶K基因,经优化后异源重组表达得到的切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于该蛋白酶K在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白质的能力,因而被广泛应用于制备脉冲电泳的染色体DNA、蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。

  严格的对比实验研究表明,本公司产品蛋白酶K与现有市场上林伯氏白色念球菌来源的蛋白酶K产品相比,对大片段蛋白质的切割能力基本相同,而在小片段蛋白质的降解能力方面较其他产品活力高出50%以上。

  通过工艺优化及单因素实验分析,优化调整培养基配方;采用先进的节能设备,降低能耗、降低生产成本。

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